畜禽舍臭氧消毒对动物血液理化指标的影响

      臭氧是一种广谱、高效的消毒剂和杀菌剂，在医疗卫生及其他行业消毒中已得到广泛应用。目前我国畜禽养殖场防疫消毒存在诸多问题，臭氧作为绿色消毒剂应用于畜禽防疫消毒，杀毒灭菌能力强，既经济又方便，还可保证食品安全，值得在养殖业中大力推广。在养殖业中常采取带动物消毒的方法，为评价其在消毒使用中对畜禽体的安全性本试验观察了畜禽舍臭氧消毒对小鼠、兔、鸡的血液生理指标和血清生化指标的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物 
      健康新西兰兔40只，雌雄不限，体重1～2kg，由北京农业职业学院实验动物场提供；21日龄肉鸡公鸡30只，由北京农业职业学院实验动物场提供；昆明系小鼠30只，由天坛生物医药公司提供。
1.2 仪器 
      全自动血细胞计数仪Medicon24000，德国西门子公司产品，BSAIC自动血液生化分析仪，法国西克曼公司产品；臭氧发生器，型号为BGY-Q4，臭氧产量1.5g～2g/h；臭氧浓度分析仪，型号为ZX-01，北京超能自控实验技术研究所产品。
1.3 试验设计 
      将40只新西兰兔分成4组，即对照组、臭氧处理1h组、臭氧处理2h组、臭氧处理3h组，每组设立独立兔舍容积为40.5m3；30只实验小鼠和30只实验肉鸡分成3组，即对照组、臭氧处理1h组、臭氧处理2h组，每组设立独立舍容积为23.3m3。对照组常规饲养，臭氧处理组分别于臭氧发生器开机处理1h、2h采血测定各项指标。
1.4 血样采集 
      实验小鼠眼眶采血2mL，兔耳静脉采血2mL，鸡翅下静脉采血2mL。用微量血球仪取20L血液在生理盐水作血常规指标测定；1mL血液离心分离血清后作生化指标测定。
1.5 血液指标测定
1.5.1血常规指标 
      红细胞计数 (RBC)、白细胞计数(WBC)、血红蛋白浓度(HGB)、血球压(HcT)、红细胞平均体积(MCV)、红细胞平均血红蛋白(MCH)、红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度(RDW)、血小板分布宽度(PDW)。
1.5.2血清生化指标 
      总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、磷(P)、钙(Ca)、尿素氮(BUN)、肌酐(CRE)、总胆红素(T-BIL)、直接胆红素(D-BIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)、尿酸(UA)。
1.6 统计学处理 
      各组数据以±s表示，组间差异显著性判定采用7检验。

2 结果

2.1 臭氧浓度检测 
      兔舍：舍内温度25℃，相对湿度60，臭氧发生器每舍放置1台，开机后舍内臭氧浓度1h为2.6mg/m3，2h为3.9mg/m3，3h为4.6mg/m3。鼠舍和肉鸡舍：舍内温度25℃，相对湿度60，臭氧发生器每舍放置1台，开机后舍内臭氧浓度1h为2.8mg/m3，2h为4.3mg/m3。停机后30min检测室内臭氧浓度均低于0.1mg/m3。
2.2 兔舍臭氧消毒对兔血液生理指标和血清生化指标的影响 
      臭氧发生器开机处理1h、2h、3h后，兔的RBC、WBC、HGB、HCT、MCV，MCH、MCHC和RDW等8项血液生理指标与对照组比较差异均不显著(P>0.05)，TP、AIB、GLU、P、Ca、BUN、CRE、T-BIL、D-BIL、ALT、AST、ALP、GGT和UA等14项血清生化指标与对照组比较差异均不显著(P>0.05)。
2.3 鼠舍臭氧消毒对小鼠血清生化指标的影响 
      臭氧发生器开机处理1h、2h后，小鼠TP、ALB、GLU、P、Ca、BUN、CRE、T-BIL、D-BIL、ALT、AST、ALP、GGT和UA等14项血清生化指标与对照组比较差异均不显著(P>0.05)。
2.4 肉鸡舍臭氧消毒对鸡血清生化指标的影响 
      臭氧发生器开机处理1h、2h后，鸡TP、ALB、GLU、P、Ca、BUN、CRE、T-BIL、D-BIL、ALT、AST、ALP、GGT和UA等14项血清生化指标与对照组比较差异均不显著(P>0.05)。

3 讨论 

      目前，畜禽养殖场大多采用化学药剂或紫外线来消毒，但这些方法都存在不同程度的副作用。臭氧消毒灭菌具有广谱高效、无残害、无消毒死角等优势，而且在无人状况下能自动程控空气消毒，使用非常方便。目前在养殖业方面臭氧主要用于空舍消毒，在带动物舍消毒方面应用研究很少，仅有用臭氧对实验动物饲养室进行消毒的研究报道。
      为评价臭氧在消毒使用中对畜禽体的安全性，本试验观察了畜禽舍臭氧消毒对小鼠、兔、鸡的血液生理指标和血清生化指标的影响。结果可见，兔舍臭氧处理1h、2h和3h及小鼠、鸡舍臭氧处理1h和2h后，兔、鸡，小鼠的RBC、WBC、HGB等8项血常规指标和TP、ALB、TG等14项血清生化指标与对照组比较均无显著性差异(P>0.05)。结果表明，畜禽舍臭氧消毒2h(臭氧浓度范围为2.6mg/m3～4.6mg/m3)对小鼠、鸡、兔的血液生理生化指标均无明显影响，且关机后30min，臭氧的浓度可降至0.1mg/m3下，达到《消毒技术规范》关于大气中臭氧允许浓度。结果显示臭氧对受试动物血液学以及肝、肾功能、脂肪代谢、蛋白代谢均无不良影响，初步提示利用臭氧发生器进行畜禽养殖场带动物舍消毒是安全的、无明显毒性作用，为畜禽养殖场及实验动物环境消毒方面推广应用臭氧消毒提供了试验依据。已有研究表明，臭氧对室内空气中细菌有较强的杀灭效果]。臭氧消毒空气浓度为1～2mg/m3，持续30min。对各种细菌的杀灭率可达99%以上，同时可降低空气中的二氧化硫、氮氧化物、挥发酚，对甲醛的降低率为41%，以0.25～0.38mg/L浓度的臭氧气体可完全灭活空气中流感病毒和疱疹病毒。本试验条件下臭氧对畜禽舍空气中氨和细菌的净化效果与前报道基本一致。Bignami等口叩将怀孕7d的CD21小鼠分别在0.8、1.6和2.4mg/m3的环境下饲养至第17天，观察臭氧对CD21小鼠繁殖性能的影响。结果发现，试验组孕鼠出生的小鼠在体型大小、性别比例、死胎数、新生小鼠死亡率等方面与对照组没有差别。关于本试验条件下臭氧消毒对动物的遗传性能、生长发育以及各系统功能等方面的影响，还需进一步深入研究，为臭氧消毒积累相关的生物安全资料。

参考文献：
[1] 周密，薛秉忠，张帆．臭氧的消毒作用、影响因素及分解动力学[J]．上海预防医学杂志，1998，10(8)：350．
[2] 王静宏，韩伟亭．臭氧消毒技术在净化空调系统中的应用[J]．中国卫生工程学，2003，2(1)：45．
[3] 易义珍，唐明德，王伟，等．低浓度臭氧对小鼠饲养室空气中氨和细菌净化效果的研究[J]．实用预防医学，2002，9(16)．
[4] 卫生部卫生法制与监督司．消毒技术规范[S]．北京：中华人民共和国卫生部，2002．210．
[5] 刘素平，张其川，胡光春．DS-I型臭氧消毒器对物表消毒效果的试验观察[J]．中国消毒学杂志，1998，15(4)：234．
[6] 张国利，赵勇，孙克勤，等．空气消毒效果的检测方法的研究[J]．中国消毒学杂志，2003，20(2)：122．
[7] 王静宏，韩伟亭．臭氧消毒技术在净化空调系统中的应用[J]．中国卫生工程学，2003，2(1)：45．
[8] 汪耀株，唐明德，易义珍，等．低浓度臭氧净化空气中甲醛效果的实验性研究[J]．实用预防医学，2002，9(1)：28．
[9] 杨华明，易滨．现代医院消毒学[M]．北京：人民军医出版社，2002．45-93．