一种臭氧消毒机生产臭氧水杀菌效果的试验观察

提要：目的了解臭氧消毒机产生的臭氧水杀菌效果，为合理使用臭氧消毒机提供科学依据。方法采用流动浸泡载体定量杀菌试验及现场试验进行了实验室观察。结果臭氧消毒机全密闭式臭氧水容器中以40L/min速度通入臭氧气体水，30min生产臭氧水400L，臭氧含量为11mg/L。用臭氧水原液作流动浸泡作用2.5min，对载体上大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的杀灭对数值均>3.00；作用5min，对铜绿假单胞菌、白色念珠菌的杀灭对数值均>3.00。臭氧水流动浸泡作用15min，对瓷碗、竹筷和黄瓜皮上污染大肠杆菌的杀灭对数值均>3.00；对物体表面上自然污染菌的杀灭对数值均>1.00。结论该臭氧消毒机产生的臭氧水，采用流动浸泡法可有效杀灭载体上细菌繁殖体和真菌达到消毒合格要求；现场试验用同样方法可杀灭餐具和果蔬表面上大肠杆菌达到消毒合格要求。
 
Key words: disinfection machine；ozone water；germicidal efficacy
 
      水中含有一定浓度的臭氧可显示出很强的杀菌作用。由于臭氧在水中溶解度较低，所以臭氧水很不稳定。采用臭氧发生器连续向水中冲入臭氧，可使水中保持一定浓度的臭氧用于冲洗消毒。臭氧消毒机运用电晕放电原理产生臭氧，经气氧混合器溶入水中，产生臭氧水流量约40L/min。为观察该臭氧消毒机产生的臭氧水杀菌效果，进行了实验室和现场杀菌效果观察。现将结果报告如下。
 
1 方法
1.1 水中臭氧含量测定
开启臭氧消毒机，调节出水流量40L/min，分别在启动后不同时间采集臭氧水立即进行碘量法测定臭氧含量。每采样一式3份，每份样本300ml，每次重复测定3次。
 
1.2 染茵载体制备
      试验菌为金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)、大肠杆菌(8099)、铜绿假单胞菌(ATCC 15442)、白色念珠菌(ATCC 10231)。取各试验菌24 h新鲜斜面培养物，用含胰蛋白胨生理盐水(TPS)洗下菌苔并充分振荡混匀，将其稀释配制成试验菌悬液。分别取各菌悬液0.02 ml滴染于灭菌的脱脂白色平纹布片(10mmx10mm)上，干燥备用。
 
1.3 中和剂鉴定试验
      试验菌分别用金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌为代表，设计6组，按中和剂载体定量杀菌试验程序进行。结果评价，以第1组无试验菌生长或仅有少量试验菌生长，第2组菌数较第1组为多，第3、4、5组有相似量试验菌生长且组问菌落数误差率不超过15%，第6组无菌生长时，表明所选中和剂及其浓度适宜。试验重复3次。
 
1.4 流动浸泡载体定量杀菌试验
      取不锈钢网放于接水容器底部中央，将染菌片放不锈钢网表面，染菌片上再盖一不锈钢网片。启动臭氧消毒机全密闭式臭氧水容器以40L/min速度持续通入臭氧气体30min，臭氧水沿容器壁流下，流动浸泡消毒至预定时间时。取出样片，移入5ml含中和剂试管内，中和作用10min，经充分振荡洗脱菌片上细菌。连同阳性对照（用同样方法流动浸泡于不含臭氧的水中），进行活菌计数，计算杀灭对数值。试验重复3次。
 
1.5 模拟现场消毒试验
      选择餐具和黄瓜（代表果蔬）作为试验对象。在餐具瓷碗的内侧面上部5cmx5cm面积上和竹筷前端12.5cm长度表面（黄瓜表面标出2cm长度），滴染大肠杆菌悬液。每件样品染菌量为0.1，染菌后置37℃恒温干燥30min进行试验。臭氧消毒机按照上述参数产生臭氧水，用此臭氧水流动浸泡人工染菌瓷碗和竹筷作用15min；阳性对照组食具与试验组同法染菌，浸泡于PBS溶液中。作用结束后，对消毒处理前后的餐具染菌表面用棉拭作涂抹采样，将采样棉拭投入含中和剂的试管内，经充分振荡洗脱，取样作用活菌计数。试验重复30份。
 
1.6 现场消毒试验
      物体表面选择工作台面作为试验对象。在台面上标出5cm×5cm面积，首先用棉拭涂抹法作消毒前采样。臭氧消毒机完全按照上述参数产生臭氧水，用此臭氧水流动冲洗消毒台面15min。用无菌棉拭对消毒后表面作涂抹法采样。将采样棉拭投含中和剂的试管内，经充分振荡洗脱，取样进行活菌计数，计算杀灭对数值。试验重复30份。
 
2 结果
2.1 臭氧含量测定结果
      经碘量法测定结果表明，该臭氧消毒机，在全密闭式臭氧水容器中以40L/min速度持续通入臭氧气体，分别于5、10、15、20、25、30、35 min取样测定臭氧含量依次为2.50、3.38、5.14、6.02、9.98、11.22、11.38 mg/L。
 
2.2 中和剂鉴定试验结果
      结果表明，用含5g/L硫代硫酸钠和10g/L吐温80的磷酸盐缓冲液作为中和剂，可有效中和臭氧水对试验菌的残留作用，且中和剂、中和产物对试验菌生长无明显影响。
 
2.3 流动浸泡载体定量杀菌试验结果
      该臭氧消毒机全密闭式臭氧水容器中以40L/min速度持续通入臭氧气体30min，用此臭氧水进行流动浸泡作用2.5min，对载体上大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的杀灭对数值均>3.00；作用5min，对铜绿假单胞菌、白色念珠菌的杀灭对数值均>3.00(表1)。

试验菌	阳性对照组平均菌数（cfu/片）		作用不同时间（min）的平均杀灭对数值
	流动浸泡冲洗前	流动浸泡冲洗后	2.5	5	10
金黄色葡萄球菌	2 000 000	1 800 000	3.22	4.68	5.88
大肠杆菌	1 800 000	1 570 000	3.36	4.82	5.96
铜绿假单胞菌	2 600 000	2 270 000	2.98	4.27	5.29
白色念珠菌	1 600 000	1 280 000	2.26	4.06	5.11

2.4 模拟现场消毒试验结果
      用臭氧水原液流动浸泡人工染菌的瓷碗和竹筷，作用15 min，对瓷碗和竹筷上大肠杆菌的杀灭对数值均>3.00。用此臭氧水进行流动浸泡消毒黄瓜作用15 min，对黄瓜皮上大肠杆菌的杀灭对数值均>3.00。
 
2.5 现场消毒试验结果
      用臭氧水原液冲洗消毒工作台面作用15 min，对台面上自然菌的杀灭对数值均>1.00。
 
3 讨论
      臭氧是由三个氧离子组成的淡蓝色、有腥臭味的气体，是一种强氧化剂和催化剂。臭氧水作为一种化学消毒剂，臭氧虽然稳定性差，有一定的腐蚀性，受有机物影响较大，但仍具有使用方便、作用广谱、杀菌快速等优点，故近年来在饮水消毒、污水处理、食品保鲜、冷冻储藏、医院消毒、家庭消毒等方面的消毒研究有较快发展。关于臭氧水杀菌效果研究报告较多，但采用流动载体浸泡杀菌试验报告并不多见。本研究用臭氧消毒机连续产生的臭氧水作流动浸泡载体杀菌试验，结果证明其臭氧含量较高，对载体上细菌繁殖体和真菌杀灭效果都要比悬液定量杀菌试验需要的剂量大，其杀菌变化规律与文献报道类似。研究结果可以认为，臭氧水消毒用消毒机连续产生臭氧水作流动浸泡更符合实际使用要求，可以保持水中有足够的臭氧浓度。
 
参考文献
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信息来源: 中国消毒学杂志

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